X-Gluc 5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-葡糖苷酸環(huán)己胺鹽（X-beta-D- glucuronide CHA salt）

——轉基因植物zui常用報告基因GUS顯色底物，GUS染色定性研究

搜索關鍵詞：β-葡萄糖苷酶（β-glucuronidase，GUS）, 藍色顯色底物, 轉基因植物GUS表達, GUS染色（定性）, 報告基因gusA（uidA）, 活性檢測,  CAS：114162-64-0

作用機制：

X-Gluc，也稱為5-Bromo-4-chloro-3-indoxyl-beta-D-glucuronide（5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-葡糖苷酸），是β-葡萄糖苷酶（β-glucuronidase，GUS）的顯色底物，由一種廣泛使用的報告基因gusA（uidA）所編碼。GUS水解X-Gluc，生成一種無色的葡萄糖醛酸和一種肉眼可見的氯-溴靛藍（chloro-bromoindigo）深藍色沉淀。利用這一特性，X-Gluc常用來檢測植物細胞和組織中的GUS表達；另外，X-Gluc還能用來檢測大腸桿菌引起的感染狀況；或檢測食物或水源是否受細菌污染。

主要應用：轉基因植物報告基因GUS活性檢測，X-gluc用作顯色底物。

普遍應用優(yōu)勢在于：絕大多數(shù)植物細胞內不存在內源性的GUS活性，而且GUS基因表達產物具有檢測方法簡單、靈敏度高，易于定量及定性分析，能夠與其他蛋白質基因融合等優(yōu)勢，因此，GUS基因為植物工程研究中應用zui廣泛的報告基因（報道基因）之一。

1. GUS活性檢測（組織化學定位法，定性研究）

GUS催化底物X-gluc在酶活性位點生成深藍色沉淀，為研究外源基因在植物中表達具體部位研究提供很好的研究手段。且GUS酶和顯色產物非常穩(wěn)定，植物中可以積累。

1. GUS染色液制備【作為參考，可按照具體實驗條件來調整】

2. GUS定性染色步驟

1. GUS活性檢測（熒光分析法，定量研究）

GUS催化熒光底物MUG 4-甲基傘型酮-beta-D-葡糖苷酸，將其水解為4-MU（4-甲基傘型酮）和β-D-葡萄糖醛酸。4-MU中的羥基解離后在365nm的光激發(fā)下產生455nm的熒光。此時用熒光分光光度計測定得到的是相對值，因此同時需要用標準物4-MU進行校準。

熒光定量分析GUS活性有兩種基本方法：1）在一個時間點測定GUS酶作用產物的總熒光量，需要設定空白對照，以消除內源熒光強度；2）測定一段時間內GUS的動力學過程。在酶反應初始階段，酶作用產物與時間呈線性關系，而內源性熒光物質的熒光量與時間無線性關系。由此可計算GUS酶活力。GUS酶活性通常以μg MU/min/mg蛋白質。有時也可以用樣本的鮮重來表示。

基本特性：

1. CAS NO：114162-64-0

2. 英文同義名：5-bromo-4-chloro-3-indolyl-beta-D-glucuronic acid, cyclohexylammonium salt; X-beta-D- glucuronide CHA salt; X-Gluc CHA Salt; X-glu CHA Salt; X-glcA CHA Salt; BCIG CHA Salt;

3. 分子式：C₁₄H₁₃BrClNO₇ • C₆H₁₃N

4. 分子量：521.79 g/mol

5. 純度：＞99%（HPLC）

6. 外觀：白色至類白色結晶性粉末

7. 溶解性：DMF、甲醇

8. 化學結構式：

相關產品：

注意事項

為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

— —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】

上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學和生物技術領域研究的試劑、儀器和實驗室消耗品與實驗服務工作，主要從事細胞生物學、植物學、分子生物學、免疫學、生物化學、蛋白組學。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產等領域。 本公司秉承“以人為本，以誠為信、合同守信"的經(jīng)營理念。堅持"品質保障"的原則為廣大客戶提供優(yōu)質產品。

X-Gluc 克隆與表達分析

X-Gluc 克隆與表達分析