IPTG 異丙基-β-D-硫代半乳糖苷
簡要描述:
IPTG 異丙基-β-D-硫代半乳糖苷,誘導(dǎo)細(xì)菌lac或tac操縱子調(diào)控的基因轉(zhuǎn)錄,尤其是水解酶β-半乳糖苷酶(β-gal,beta-gal)。一旦表達(dá),β-gal水解β-半乳糖苷和乳糖為單糖。IPTG通常用于β-gal活性分析,當(dāng)含大腸桿菌來源lacZ基因的載體轉(zhuǎn)染進(jìn)入細(xì)胞后,編碼表達(dá)β-gal,細(xì)胞裂解后,通過催化底物ONPG的顏色反應(yīng)即可定量分析活性。
產(chǎn)品時(shí)間:2024-03-25
IPTG 異丙基-β-D-硫代半乳糖苷/重組蛋白表達(dá)誘導(dǎo)物/啟動lacZ基因
產(chǎn)品關(guān)鍵詞:
IPTG 異丙基-β-D-硫代半乳糖苷;X-gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷;β-半乳糖苷酶(β-gal,beta-gal);lac repressor 乳糖阻遏物;lacZ Operon lacZ操縱子;Blue-white Screening 藍(lán)白斑篩選;CAS NO.: 367-93-1
基本描述:
IPTG,英文全名Isopropyl-beta-D-thiogalactoside,中文全名異丙基-β-D-硫代半乳糖苷,CAS NO:367-93-1,誘導(dǎo)細(xì)菌lac或tac操縱子調(diào)控的基因轉(zhuǎn)錄,尤其是水解酶β-半乳糖苷酶(β-gal,beta-gal)。一旦表達(dá),β-gal水解β-半乳糖苷和乳糖為單糖。IPTG通常用于β-gal活性分析,當(dāng)含大腸桿菌來源lacZ基因的載體轉(zhuǎn)染進(jìn)入細(xì)胞后,編碼表達(dá)β-gal,細(xì)胞裂解后,通過催化底物ONPG的顏色反應(yīng)即可定量分析活性。IPTG也是硫代半乳糖苷轉(zhuǎn)乙?;傅牡孜?,文獻(xiàn)報(bào)道還能誘導(dǎo)合成細(xì)菌青霉素酶。體內(nèi)研究IPTG的一個(gè)重要優(yōu)勢在于,IPTG不會大腸桿菌所代謝,IPTG濃度和lac p/o控制基因表達(dá)都保持穩(wěn)定。
IPTG誘導(dǎo)lacZ表達(dá)的作用機(jī)制:
IPTG的主要生理功能:
1)β-半乳糖苷酶(β-gal,beta-gal)活性檢測
β-半乳糖苷酶(β-galactosidase,β-gal)由大腸桿菌lacZ基因編碼,是zui常用的一種報(bào)告酶,用來研究哺乳動物細(xì)胞的基因表達(dá),蛋白-蛋白相互作用,以及標(biāo)準(zhǔn)化轉(zhuǎn)染效率。
檢測原理:IPTG誘導(dǎo)lacZ基因表達(dá)β-半乳糖苷酶(β-gal),細(xì)胞裂解后,體系中加入無色的ONPG(鄰硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷),被β-gal水解為鄰硝基苯酚(o-nitrophenol),生成黃色(420nm)。顏色反應(yīng)的強(qiáng)度與β-gal活性成正比
2)藍(lán)白斑篩選(Blue-white screening)
IPTG普遍用在需要誘導(dǎo)β-gal活性的克隆步驟中,zui為常見的就是和X-gal聯(lián)合使用進(jìn)行藍(lán)白斑克隆篩選,或與Magenta-gal聯(lián)合使用進(jìn)行紅/白斑克隆篩選。
作用機(jī)理: 當(dāng)目的基因插入載體lacZ基因,破壞β-gal表達(dá)并阻止其表達(dá)。細(xì)菌在含X-gal的培養(yǎng)基上生長,β-gal水解此底物生成一不可溶藍(lán)色產(chǎn)物,菌落呈藍(lán)色。若β-gal不能表達(dá),細(xì)菌克隆則無法催化X-gal底物,菌落呈白色,以此區(qū)分轉(zhuǎn)化重組載體或非重組載體的克隆子。
3)重組蛋白的誘導(dǎo)表達(dá)
IPTG也可用于重組蛋白的誘導(dǎo)表達(dá)。在這些體系中,待研究蛋白在IPTG誘導(dǎo)型啟動子下游編碼。IPTG誘導(dǎo)待研究蛋白表達(dá),對細(xì)胞裂解后,使用一系列合適方法來純化蛋白,如His-tag或GST-tag純化系統(tǒng)(融合相應(yīng)標(biāo)簽的重組蛋白)。
產(chǎn)品特性
1)CAS NO:367-93-1
2)英文同義名:Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside; Isopropyl β-D-thiogalactoside; IPTG;
3)中文同義名:異丙基-β-D-硫代半乳糖苷;異丙基 β-D-1-硫代半乳糖吡喃糖苷;
4)分子式:C9H18O5S
5) 分子量:238.30 g/mol
6) 純度:≥99%(基于干重,HPLC)
7) 外觀:白色結(jié)晶粉末
8) 雜質(zhì):≤0.1% Dioxane(二氧六環(huán))
9) 溶解性:溶于水、乙醇
10)化學(xué)結(jié)構(gòu):
使用方法【詳見maokangbio】
- IPTG儲存液配制
- 藍(lán)白斑篩選方法
- IPTG誘導(dǎo)重組蛋白的表達(dá)
產(chǎn)品訂購: 更大包裝或產(chǎn)品技術(shù)問題,請來電/在線咨詢,.maokangbio
貨號 | 產(chǎn)品名稱 | CAS NO. | 規(guī)格 | 價(jià)格(元) | 貨期 |
MF2002-5G | IPTG 異丙基-β-D-硫代半乳糖苷 | 76455-82-8 | 5g | 195 | 現(xiàn)貨 |
MF2002-10G | IPTG 異丙基-β-D-硫代半乳糖苷 | 76455-82-8 | 10g | 350 | 現(xiàn)貨 |
MF2002-100G | IPTG 異丙基-β-D-硫代半乳糖苷 | 76455-82-8 | 100g | 1800 | 現(xiàn)貨 |
相關(guān)產(chǎn)品: 更大包裝或產(chǎn)品技術(shù)問題,請來電/在線咨詢,.maokangbio
貨號 | 產(chǎn)品名稱 | CAS NO. | 規(guī)格 | 價(jià)格(元) | 貨期 |
MM2005-1G | ONPG 鄰硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷 | 369-07-3 | 1g | 115 | 現(xiàn)貨 |
MS5510-10G | DL-Dithiothreitol (DTT) 二硫蘇糖醇 | 3483-12-3 | 10g | 380 | 現(xiàn)貨 |
MS0839-5G | D-(-)-Arabinose D-(-)-阿拉伯糖 | 10323-20-3 | 5g | 70 | 現(xiàn)貨 |
MP1610-1ML | 廣譜型蛋白酶抑制劑混合物(不含EDTA,100× DMSO儲液) | / | 1ml | 380 | 現(xiàn)貨 |
注意事項(xiàng)
為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
— —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】
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IPTG 異丙基-β-D-硫代半乳糖苷
IPTG 異丙基-β-D-硫代半乳糖苷