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Nitrocefin 頭孢硝噻吩

Nitrocefin 頭孢硝噻吩

簡要描述:

Nitrocefin 頭孢硝噻吩完整結(jié)構(gòu)的頭孢硝噻吩處于紫外吸光區(qū)(~380nm,黃色),酶解產(chǎn)物遷移到可見光光譜區(qū)(~500nm,紅色)。

產(chǎn)品時間:2024-03-21

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Nitrocefin 頭孢硝噻吩保存與運輸方法

  保存:-20°C避光保存,儲存于惰性氣體下。至少2年穩(wěn)定。

  運輸:冰袋運輸。

  使用方法

  1. 頭孢硝噻吩儲存液(10mg/ml)制備

  a)使用前從冰箱內(nèi)取出產(chǎn)品置于室溫回溫至少20min并進(jìn)行低速離心;b)吸取100μl高質(zhì)量DMSO加入1mg頭孢硝噻吩,充分溶解并混勻。可按照單次用量分裝后,-20°C避光保存。

  2. 頭孢硝噻吩工作液(1mg/ml)制備

  頭孢硝噻吩的典型工作濃度為0.5-1.0mg/ml,此制備物一般呈黃色。

  取20μl頭孢硝噻吩(10mg/ml)儲存液加入180μl

  PBS緩沖液(0.1M,中性pH),混勻后,即得到頭孢硝噻吩(1mg/ml)工作液。多余的工作液可置于-20°C避光保存,必須在2周用完。

  3. 快速檢測分析

  一旦接觸β-內(nèi)酰胺酶產(chǎn)生菌,待檢樣本一般可快速產(chǎn)生陽性反應(yīng)。通常建議20-30min的反應(yīng)時間,同時設(shè)置陰性對照。

  3.1 玻片表面分析法

  a)吸取一滴頭孢硝噻吩工作液(1mg/ml)到干凈的玻璃載玻片表面;b)使用無菌接種環(huán)挑取一固體培養(yǎng)克隆,并與液滴混勻;c)若20-30min內(nèi)能觀察到紅色,表明β-內(nèi)酰胺酶活性。【若有必要,可多滴頭孢硝噻吩工作液,防止干燥】

  3.2 直接接觸分析法

  a)直接吸取一滴頭孢硝噻吩工作液(1mg/ml)到分離菌落表面;b)若20-30min內(nèi)能觀察到紅色,表明β-內(nèi)酰胺酶活性。

  3.3 肉湯培養(yǎng)液分析法

  a)取1ml肉湯培養(yǎng)液,加入3-5滴頭孢硝噻吩工作液(1mg/ml);b)若20-30min內(nèi)能觀察到紅色,表明β-內(nèi)酰胺酶活性。

  3.4 細(xì)胞裂解液分析法

  a)超聲裂解1ml細(xì)胞懸液;b)加入3-5滴頭孢硝噻吩工作液(1mg/ml)到裂解懸液;b)若20-30min內(nèi)能觀察到紅色,表明β-內(nèi)酰胺酶活性。

  3.5 濾紙分析法

  a)將一小片濾紙片(~3 x 3 cm)飽和吸收頭孢硝噻吩工作液(1mg/ml),然后置于干凈的培養(yǎng)皿內(nèi);b)跳取一分離的克隆,并涂抹到浸漬濾紙片上;c)若20-30min內(nèi)能觀察到紅色,表明β-內(nèi)酰胺酶活性。

  注意事項

  為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

 

Nitrocefin 頭孢硝噻吩簡介

頭孢硝噻吩(Nitrocefin,CAS NO:41906-86-9),具有顯色特性的一種頭孢菌素(cephalosporin),通常用來檢測由β-內(nèi)酰胺類抗生素耐藥菌代謝產(chǎn)生的β-內(nèi)酰胺酶(beta-lactamases)活性。作用機制在于:幾乎所有β-內(nèi)酰胺酶能水解頭孢硝噻吩β-內(nèi)酰胺環(huán)上羰基碳和氮基間的酰胺鍵,這一過程通過顏色的變化可用肉眼來判斷。

產(chǎn)品特性

  1. CAS NO:41906-86-9

  2. 化學(xué)名:(6R)-3-[(1E)-2-(2,4-dinitrophenyl)ethenyl]-8-oxo-7R-[(2-thienylacetyl)amino]-5-thia-1-azabicyclo

  [4.2.0]oct-2-ene-2-carboxylic acid

  3. 同義名:Nitrocephin

  4. 分子式:C21H16N4O8S2

  5. 分子量:516.51

  6. 純度:≥95%(HPLC)

  7. 外觀:橘色粉末

  8. 溶解性:DMSO(30 mg/ml)、DMF(30 mg/ml)

 

  

 

 

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