MKRed核酸凝膠染料 核酸純化
簡要描述:
MKRed核酸凝膠染料 核酸純化(效果同GelRed,DuRed)核酸電泳,是一種*的油性大分子,不能穿透細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)。不易揮發(fā)升華,人體不會(huì)吸入。艾姆斯氏測(cè)試結(jié)果也表明MKred在凝膠染色濃度下*無誘變性,相對(duì)于EB的強(qiáng)致癌性是一種安全無毒的核酸染料。
產(chǎn)品時(shí)間:2024-03-26
MKRed Nucleic Acid Gel Stain (10,000× in Water)
MKRed核酸凝膠染料(效果同GelRed,DuRed)
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產(chǎn)品關(guān)鍵詞:
MKRed 核酸凝膠染料;GelRed;DuRed;Ethidium Bromide, EB;Ames Test 艾姆斯試驗(yàn)法;GoldView;SYBR Green I;
訂購信息:【活動(dòng)期間按照活動(dòng)價(jià)執(zhí)行】
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 | 價(jià)格(元) |
MKRed Nucleic Acid Gel Stain (10,000× in Water) MKRed核酸凝膠染料(效果同GelRed) | MF0754-500UL | 500µl | 460 |
MF0754-2500UL | 5×500µl | 1850 |
產(chǎn)品特征
。。。傳統(tǒng)核酸染料(Ethidium Bromide, EB,溴化乙錠)的無毒安全替代品,經(jīng)艾姆斯試驗(yàn)法測(cè)試認(rèn)證。
。。。新型核酸染料(GelRed,DuRed)的同等優(yōu)質(zhì)替代品,經(jīng)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部測(cè)試認(rèn)證【見圖1】。
產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)
。。。安全無毒:*油性大分子,無法穿透細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞;不易揮發(fā),人體不會(huì)吸入;艾姆斯試驗(yàn)法(Ames Test)表明凝膠染色濃度下*沒有誘變性,與EB的強(qiáng)致癌性相比,是一種安全無毒的核酸染料。
。。。適用范圍廣:適用于瓊脂糖和聚丙烯酰胺凝膠電泳的dsDNA, ssDNA以及RNA染色。
。。。操作靈活簡單:可選擇電泳前(膠染法)或電泳后(泡染法)染色。使用方法同EB,GelRed,DuRed
。。。檢測(cè)方便:與EB具相同的光譜特征,使用與觀察EB相同的普通紫外凝膠透射儀即可,無需更改濾光片和觀察裝置。標(biāo)準(zhǔn)EB濾光片或SYBR濾光片都適用。
。。。靈敏度高,對(duì)核酸遷移影響?。哼m用于各種大小片段的電泳染色。電泳條帶不易*,片段不易遷移,不像SYBR Green I,染料濃度高時(shí)會(huì)引起條帶彎曲和遷移現(xiàn)象【見附件 常見核酸染料的性能比較】。
。。。穩(wěn)定性高:室溫穩(wěn)定保存一年,長期不用可置于+4℃保存二年。
。。。易去除,兼容性強(qiáng):用酚/lv仿提取和乙醇沉淀,或商業(yè)化的膠回收試劑盒可輕易去除核酸中的染料;與常見的下游應(yīng)用如克隆,連接和測(cè)序兼容。
應(yīng)用示例:
圖1. GelRed(Biotium)與MKRed(MKbio, Shanghai)的使用比較。1-6是不同上樣量的Marker III(依次為100ng、50ng、12.5ng、6.25ng、3.125ng);7-11是不同上樣量的血液基因組DNA(依次為200ng、150ng、100ng、50ng、25g)。凝膠配制條件:往25ml凝膠溶液加入0.25g瓊脂糖,微波爐加熱至充分溶解,冷卻至60℃左右,加入2μl GelRed或MKRed染料,混勻,倒膠。電泳條件:1%瓊脂糖凝膠,150V,20min。
圖2. EB(MPbio, USA)與MKRed(MKbio, Shanghai)的使用比較。1-5是不同管菌液的PCR產(chǎn)物(目的片段500bp左右)。凝膠配制條件:往20ml凝膠溶液加入0.2g瓊脂糖,微波爐加熱至充分溶解,冷卻至60℃左右,加入2μl EB或MKRed染料,混勻,倒膠。電泳條件:1%瓊脂糖凝膠,150V,25min。
常用核酸染料的性能比較
| MKRed(同GelRed/DuRed) | SYBR Green I | Goldview | EB |
產(chǎn)品貨號(hào) | MF0754-500UL | MF0751-100UL | MF0753-1ML | MF0756-1G |
靈敏度 | 高 | 高 | 低 | 低 |
穩(wěn)定性 | 高 | 低 | 高 | 高 |
對(duì)核酸遷移的影響 | 條帶不易彎曲,片段不易遷移 | 染料濃度高時(shí),條帶易*,遷移現(xiàn)象明顯 | 條帶不易彎曲,片段不易遷移 | 條帶不易彎曲,片段不易遷移 |
安全性 | *油性大分子,不揮發(fā)升華,不易吸入人體,不能穿透細(xì)胞膜,安全無毒。Ames Test表明染色濃度*無誘變性,無致癌毒性。 | 花箐染料,能穿透細(xì)胞膜,但容易生物降解,不會(huì)在體內(nèi)殘留,安全無毒。 | 主要成分為吖啶橙,一種煤焦油提取物,具高毒,致癌,高誘變性。 易揮發(fā)升華,易吸入人體,能進(jìn)入活細(xì)胞,不易被生物降解,長期留在體內(nèi)。 | 分子量小,易揮發(fā)升華,易吸入人體,不易生物降解,體內(nèi)長期殘留。Ames Test表明容易引起突變,是強(qiáng)誘變劑,高致癌性。 |
適用性 | 通用大小片段電泳染色。 與EB具相同的光譜特性,無需更改濾光片和觀察裝置。標(biāo)準(zhǔn)EB濾光片或SYBR濾光片都適用,使用普通紫外凝膠透射儀觀察即可,300nm處得zuijia激發(fā)。 | 100bp以上電泳染色。適用于254nm激發(fā)的紫外凝膠透射儀或可見光凝膠透射儀觀察。 | 100bp以上電泳染色。使用254nm激發(fā)的紫外凝膠透射儀或可見光凝膠透射儀觀察。 | 100bp以上電泳染色。使用普通紫外凝膠透射儀觀察即可。 |
保存與運(yùn)輸方法
保存:+4℃避光干燥保存,2年有效。
運(yùn)輸:室溫運(yùn)輸。
注意事項(xiàng)
1. MKRed雖然為安全無毒的核酸染料,對(duì)人無傷害,但請(qǐng)科研人員操作過程中注意防護(hù),盡量避免與染料的直接接觸。且染料的廢棄需符合當(dāng)?shù)匾?guī)定。
2. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
使用方法
一、膠染法(同EB,電泳前染色)
制膠時(shí)加入MKRed 核酸染料(每50mL 瓊脂糖溶液中加入5μL MKRed 10,000×水溶液)。
按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳。
用普通紫外凝膠透射儀(300nm處有zui加激發(fā))觀察以及標(biāo)準(zhǔn)EB濾光片成像。
【注意】
此方法比較節(jié)省染料,500 μL染料大約可以做100塊 50mL的膠。
由于MKRed具有良好的熱穩(wěn)定性,可以直接添加到熱的瓊脂糖溶液中而不需要等待溶液冷卻。搖晃,振蕩或者翻轉(zhuǎn)以保證染料充分混勻。也可以選擇將MKRed儲(chǔ)液加到瓊脂糖粉末和電泳緩沖液中,然后用微波爐或其他常用方式加熱以制備瓊脂糖凝膠。
MKRed兼容所有常用的電泳緩沖溶液。
含有染料的預(yù)制凝膠溶液可以大量制備,在室溫下避光保存直至用完。
如果總是看到條帶彌散或分離不理想,建議使用泡染法染色以確認(rèn)問題是否與染料有關(guān)。如果染色后問題依舊存在,則說明問題與染料無關(guān),請(qǐng)嘗試:降低瓊脂糖濃度;選用更長的凝膠;延長凝膠時(shí)間以保證邊緣清晰;改進(jìn)上樣技巧或選擇泡染法染色。
膠染法不適合預(yù)制聚丙烯酰胺凝膠,對(duì)于聚丙烯酰胺凝膠請(qǐng)使用泡染法。
二、泡染法(電泳后染色)
按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳。
用H2O將MKRed 10,000×水溶液稀釋約3,300倍制成3× 染色液(例如:將15μL MKRed 10,000×水溶液和5mL 1M NaCl混合,之后加到45mL H2O中混勻)。【注意】:染色液中加入0.1M NaCl能提高靈敏度,但如果膠染色再次使用會(huì)比較容易有沉淀產(chǎn)生。
將凝膠小心地放入合適的容器中,緩慢加入足量的3× 染色液浸沒凝膠。室溫振蕩染色30min左右,zui加染色時(shí)間根據(jù)凝膠厚度以及瓊脂糖濃度不同而略有不同。對(duì)于含3.5~10%丙烯酰胺的聚丙烯酰胺凝膠,染色時(shí)間通常介于30min-1h,丙烯酰胺含量增加,染色時(shí)間延長。
不需要脫色,但若有需要可用水清洗一下凝膠以降低背景。
用普通紫外凝膠透射儀(300nm處有zui加激發(fā))觀察以及標(biāo)準(zhǔn)EB濾光片成像。
【注意】
用泡染法染色時(shí),染料用量較多。單次使用的染色液可重復(fù)使用3次左右。
3× MKRed染色液可以大量制備,在室溫下避光保存直至用完。
常見問題【見懋康內(nèi)容】
MKRed能用于ssDNA或RNA染色嗎?
MKRed與下游應(yīng)用如克隆,連接或測(cè)序兼容嗎?
MKRed與什么上樣緩沖液兼容?
是否能將MKRed加入DNA中,然后進(jìn)行電泳檢測(cè)?使用濃度多少?
哪種發(fā)射濾片適用于MKRed?
電泳后的MKRed預(yù)制膠能重復(fù)使用?
MKRed的工作原理是什么?化學(xué)結(jié)構(gòu)是什么?
電泳過程中MKRed會(huì)發(fā)生遷移嗎?
MKRed需要避光使用嗎?
不小心將MKRed暴露在室內(nèi)光下,是否還能用?
MKRed能用于甲醛、聚丙烯酰胺、DGGE、EMSA或PFGE凝膠?
MKRed能用于彗星實(shí)驗(yàn)(COMET assay)?
——Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】
本公司秉承“以人為本,以誠為信、合同守信"的經(jīng)營理念。堅(jiān)持"品質(zhì)保障"的原則為廣大客戶提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。
MKRed核酸凝膠染料 核酸純化
MKRed核酸凝膠染料 核酸純化