Benzonase 全能核酸酶蛋白抽提
簡(jiǎn)要描述:
Benzonase 全能核酸酶蛋白抽提,一種源于粘質(zhì)沙lei氏菌(Serratia Marcescen,又稱為靈桿菌)的非特異性核酸內(nèi)切酶,由兩個(gè)*一樣的亞基構(gòu)成,每個(gè)亞基大約30kDa,含有245個(gè)氨基酸和兩個(gè)必需的二硫鍵??梢郧懈詈徒到飧鞣N形式的DNA和RNA(單鏈,雙鏈,線性,環(huán)狀,或超螺旋形式),生成含有5’-磷酸末端的3-5個(gè)寡核苷酸殘基片段,并且在很多種操作條件下有效。
產(chǎn)品時(shí)間:2024-03-26
Benzonase Nuclease 全能核酸酶/廣譜核酸酶
(酵母重組表達(dá),無(wú)細(xì)菌內(nèi)毒素殘留,無(wú)蛋白酶污染)
產(chǎn)品關(guān)鍵詞:
Benzonase Nuclease 全能核酸酶(廣譜核酸酶);粘質(zhì)沙lei氏菌(Serratia Marcescen);非特異性核酸內(nèi)切酶;RIPA裂解液;DNA/RNA降解;CAS:9025-65-4;
基本描述:
Benzonase,中文名全能核酸酶,或廣譜核酸酶,一種源于粘質(zhì)沙lei氏菌(Serratia Marcescen,又稱為靈桿菌)的非特異性核酸內(nèi)切酶,由兩個(gè)*一樣的亞基構(gòu)成,每個(gè)亞基大約30kDa,含有245個(gè)氨基酸和兩個(gè)必需的二硫鍵??梢郧懈詈徒到飧鞣N形式的DNA和RNA(單鏈,雙鏈,線性,環(huán)狀,或超螺旋形式),生成含有5’-磷酸末端的3-5個(gè)寡核苷酸殘基片段,并且在很多種操作條件下有效。對(duì)核酸堿基序列無(wú)特異性要求,可在鏈內(nèi)任意核苷酸間進(jìn)行切割,廣泛用于去除生物制品中的核酸。
主要應(yīng)用:
1、科研研究中,作為培養(yǎng)細(xì)胞上清和細(xì)胞裂解液去粘度的*酶制劑,去除核酸干擾提高后續(xù)蛋白純化或功能研究;
需求背景:進(jìn)行重組蛋白純化或者天然蛋白提取研究中,*步就需要用細(xì)胞/組織裂解液如RIPA對(duì)其進(jìn)行裂解釋放蛋白,此時(shí)往往伴隨著大量的基因組DNA被釋放出來(lái),很多并不是獨(dú)立存在的,往往與核蛋白以復(fù)合物的形式存在,導(dǎo)致提取物非常粘稠,呈鼻涕狀。蛋白提取過(guò)程中若不能很好處理這些粘稠基因組,會(huì)造成蛋白提取效率的降低極核蛋白的丟失。傳統(tǒng)方法有采用超聲處理,DNase/RNase消化來(lái)降低或消除核酸影響,但由于操作的非標(biāo)準(zhǔn)化,通常難以評(píng)估此核酸清除步驟的有效性和數(shù)據(jù)穩(wěn)定性。
此時(shí),若在加裂解液的同時(shí)加入一定量的Benzonase Nuclease全能核酸酶(廣譜核酸酶),可以很好的清除粗提物中的核酸,有效降低粘度【見(jiàn)圖1】,提高后續(xù)操作的效率。
圖1、細(xì)胞裂解液經(jīng)Benonase處理和未處理的比較圖。左管是僅加RIPA裂解液所得的離心產(chǎn)物,可看到鼻涕狀粘稠物懸浮在管中;右管事加RIPA裂解液和Benonase共同處理所得的離心產(chǎn)物,可看到上清非常透明。
2、用在生化分析樣品制備— — ELISA、色譜分析、雙相電泳和足跡分析等過(guò)程,使用本品benonase處理含有核酸的蛋白樣品,可提高分辨率,以及提高回收率。
3、疫苗工業(yè)、蛋白和多糖類制藥工業(yè),去除宿主核酸殘留,使得疫苗和蛋白類核酸污染顯著降低至皮克級(jí)別,提供生物功效。
4、防止細(xì)胞凝聚(Cell clumping),特別是融化凍存的細(xì)胞樣品時(shí);
應(yīng)用優(yōu)勢(shì):Benonase不僅無(wú)蛋白酶活性,而且不會(huì)對(duì)健康細(xì)胞的生長(zhǎng)造成干擾。
應(yīng)用背景:全血來(lái)源的外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMCs)在疫苗研究中具有重要的應(yīng)用價(jià)值,比如,定量疫苗誘導(dǎo)的T細(xì)胞反應(yīng)。T細(xì)胞反應(yīng)實(shí)驗(yàn)zui初要求新鮮分離的細(xì)胞從而達(dá)到zui加的檢測(cè)信號(hào),這給大規(guī)模的實(shí)驗(yàn)中對(duì)樣本處理提出嚴(yán)格的操作限制。然而,凍存PBMCs(尤其是從凍存血液中分離出的PBMCs)一旦融化非常容易聚集到一起,影響后續(xù)的分析。
應(yīng)用示例:Smith JG et al.研究顯示Benonase(≥50 U/ml)加入PBMC融化緩沖液中有效預(yù)防細(xì)胞凝聚,從而使得PBMC冷凍保存的應(yīng)用成為可能。【文獻(xiàn)來(lái)源:Smith JG et al.Development and validation of a gamma interferon ELISPOT assay for quantitation of cellular immune responses to varicella-zoster virus. Clin Diagn Lab Immunol. 2001 Sep;8(5):871-9.】
Fig. 2. Comparison of results with frozen PBMCs isolated from freshly collected blood versus blood stored overnight (4°C). SFC represent the adjusted VZV ELISPOT response, i.e., the mean response to VZV antigen for replicate wells minus the mean response to MRC-5 control antigen for replicate wells.
產(chǎn)品優(yōu)勢(shì):
1、酵母重組表達(dá),無(wú)細(xì)菌內(nèi)毒素殘留?!敬蟛糠稚虡I(yè)化的Benonase都是大腸桿菌重組表達(dá),由于自身菌株特性,不管純化方法如何,或多或少都會(huì)受細(xì)菌內(nèi)毒素影響?!?/span>
2、無(wú)蛋白酶殘留,不會(huì)對(duì)蛋白本身造成干擾,影響測(cè)試結(jié)果準(zhǔn)確性。
3、比活力高≥1.0×106U/mg蛋白【活性單位定義:在37℃,pH8.0反應(yīng)條件,2.625ml反應(yīng)體系中,30min內(nèi)使△A260吸收值變化1.0(相當(dāng)于*消化37μg鮭魚精DNA成為寡核苷酸)所用的酶量定義為一個(gè)活性單位(U)】
4、提供兩種純度的產(chǎn)品:≥ 90%(SDS-PAGE),以及≥ 99%(SDS-PAGE),前者滿足zui基本的科研應(yīng)用,價(jià)格更經(jīng)濟(jì)實(shí)惠;后者滿足生物制品要求。
5、酶活性值:≥250 U/μL。對(duì)于小體積制備物,可用稀釋緩沖液20mM Tris-Cl pH8.0, 2mM MgCl2, 2mM NaCl稀釋到一定濃度,再加入體系中。稀釋后溶液可4℃保存幾天維持穩(wěn)定。
6、液體酶形式提供,使用更方便。直接加入裂解液共同使用即可。
產(chǎn)品訂購(gòu):更大包裝或產(chǎn)品技術(shù)問(wèn)題,請(qǐng)來(lái)電/在線咨詢,:。。
貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | CAS NO. | 價(jià)格(元) | 貨期 |
MP1509-25KU | Benzonase Nuclease 全能核酸酶 | 25KU | 9025-65-4 | 400 | 現(xiàn)貨 |
MP1509-50KU | Benzonase Nuclease 全能核酸酶 | 50KU | 9025-65-4 | 720 | 現(xiàn)貨 |
MP1509-100KU | Benzonase Nuclease 全能核酸酶 | 100KU | 9025-65-4 | 1380 | 現(xiàn)貨 |
【懋康精品,能大量供貨,且能提供凍干粉特殊包裝,咨詢?!?/strong>
我司提供的Benzonase,比Merck、Sigma同等類型的產(chǎn)品性價(jià)比高很多,且基本有現(xiàn)貨,見(jiàn)下:
品牌/名稱 | 貨號(hào) | 規(guī)格 | 濃度 | 價(jià)格(元) |
Merck(Benzonase Nuclease,純度>90%,E. Coli) | 70746-3 | 10KU | 25 U/μL | 1670 |
Merck(Benzonase Nuclease,純度>90%,E. Coli) | 71205-3 | 25KU | 250 U/μL | 2530 |
Sigma(Benzonase Nuclease,純度>90%,E. Coli) | E1014 | 5KU | ≥250 U/μL | 643 |
Sigma(Benzonase Nuclease,純度>90%,E. Coli) | E1014 | 25KU | ≥250 U/μL | 2254 |
【注】:Benzonase is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
相關(guān)產(chǎn)品:更大包裝或產(chǎn)品技術(shù)問(wèn)題,請(qǐng)來(lái)電/在線咨詢,:。。
貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 價(jià)格(元) | 貨期 |
MP1501-100ML | RIPA Lysis Buffer (Strong) RIPA裂解液(強(qiáng)) | 100ml | 225 | 現(xiàn)貨 |
MP1502-100ML | RIPA Lysis Buffer (Medium) RIPA裂解液(中) | 100ml | 225 | 現(xiàn)貨 |
MP1503-100ML | RIPA Lysis Buffer (Weak) RIPA裂解液(弱) | 100ml | 225 | 現(xiàn)貨 |
MP1504-100ML | Lysis Buffer for WB/IP Assays 免疫印跡及免疫沉淀用(WB/IP)裂解液 | 100ml | 225 | 現(xiàn)貨 |
MP1505-100ML | NP-40 Lysis Buffer NP-40裂解液 | 100ml | 225 | 現(xiàn)貨 |
MP1506-100ML | SDS Lysis Buffer SDS裂解液 | 100ml | 225 | 現(xiàn)貨 |
常見(jiàn)問(wèn)題(FAQs): 詳見(jiàn)懋康內(nèi)容。
問(wèn)1:在實(shí)驗(yàn)的哪一步加入Benzonase全能核酸酶? |
問(wèn)2:如何稀釋Benzonase全能核酸酶? |
問(wèn)3:Benzonase全能核酸酶是否無(wú)蛋白酶活性? |
問(wèn)4:Benzonase全能核酸酶是否安全? |
問(wèn)5:為什么Benzonase全能核酸酶不工作?什么會(huì)抑制其活性? |
問(wèn)6:發(fā)現(xiàn)Benzonase全能核酸酶活性喪失,為什么? |
問(wèn)7:一不小心將Benzonase全能核酸酶置于工作臺(tái)上整周,是否能繼續(xù)使用? |
問(wèn)8:如何抑制Benzonase全能核酸酶活性? |
問(wèn)9:如何去除體系中的Benzonase全能核酸酶? |
問(wèn)10:Benzonase全能核酸酶與蛋白酶抑制劑cocktail兼容嗎? |
注意事項(xiàng)
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
本產(chǎn)品僅能用作科研用途,不可他用。
— —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】
上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域研究的試劑、儀器和實(shí)驗(yàn)室消耗品與實(shí)驗(yàn)服務(wù)工作,主要從事細(xì)胞生物學(xué)、植物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白組學(xué)。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等領(lǐng)域。 本公司秉承“以人為本,以誠(chéng)為信、合同守信"的經(jīng)營(yíng)理念。堅(jiān)持"品質(zhì)保障"的原則為廣大客戶提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。
Benzonase 全能核酸酶蛋白抽提
Benzonase 全能核酸酶蛋白抽提