單線態(tài)氧熒光探針 Singlet Oxygen Sensor Green（SOSG）

產(chǎn)品關(guān)鍵詞：

Singlet Oxygen Sensor Green^®, SOSG；單線態(tài)氧（Singlet Oxygen _, ¹O₂）；單線態(tài)氧熒光探針；S36002；Thermo Fisher; ROS（Reactive oxygen species）活性氧物質(zhì)；

活性氧引起的許多生理?yè)p傷都可能歸因于單線態(tài)氧（¹O₂），包括與脫氧鳥苷選擇性反應(yīng)形成8-羥基脫氧鳥苷（8-OHdG）的核酸修飾。Thermo fisher（molecular probe）公司開發(fā)的Singlet Oxygen Sensor Green^®, SOSG是目前商業(yè)化可得且應(yīng)用廣泛的單線態(tài)氧熒光探針，從材料學(xué)到藥物學(xué)領(lǐng)域，比如光動(dòng)力學(xué)療法。

【特異性強(qiáng)】Singlet Oxygen Sensor Green^®, SOSG高度選擇性結(jié)合單線態(tài)氧（¹O₂）。不像其他的熒光和化學(xué)發(fā)光的單線態(tài)氧檢測(cè)試劑，SOSG與其他活性氧物質(zhì)（ROS），包括羥基自由基（·OH）、超氧陰離子（·O₂^–）和一氧化氮（NO）無可見反應(yīng)【見圖1】。

圖1、Singlet Oxygen Sensor Green (SOSG)的熒光反應(yīng)和對(duì)單線態(tài)氧（¹O₂）的特異性。A）用熒光光度計(jì)（Ex/Em=488/525nm）測(cè)定溶液內(nèi)的熒光，溶液內(nèi)含SOSG（1 µM ）和亞甲基藍(lán)（10 µM）溶于100mM pH 7.5 Tris Buffer; 單線態(tài)氧清除劑疊氮鈉（NaN3，1 mM）；或50% D₂O（重水，能夠延長(zhǎng)¹O₂的壽命）。每20s完成一次熒光測(cè)定，每次測(cè)定間隔30s（如灰條標(biāo)示）。在這30s的間隔中，樣本暴露于激光輻射（630–680 nm，<5 mW），導(dǎo)致亞甲基藍(lán)光敏生成¹O₂。B）用熒光光度計(jì)（Ex/Em=488/525nm）測(cè)定溶液內(nèi)的熒光，溶液為50mM pH 7 Tris buffer，1mM ，SOSG（1 µM ），或含SOSG（1 µM ）。產(chǎn)生尿酸和超氧化物。超氧化物瞬間被H₂O₂降解。

【MK熒光特征】Singlet Oxygen Sensor Green^®, SOSG與單線態(tài)氧（¹O₂）反應(yīng)前，探針初發(fā)弱藍(lán)色熒光，激發(fā)峰在372nm和393nm，發(fā)射峰在395nm和416nm。當(dāng)含單線態(tài)氧（¹O₂），探針發(fā)射綠色熒光，光譜特征類似于熒光素（大激發(fā)/發(fā)射波長(zhǎng)約504/525nm）。

【MK線性化關(guān)系】研究發(fā)現(xiàn)Singlet Oxygen Sensor Green^®, SOSG的熒光產(chǎn)物在某些溶液中隨著時(shí)間被降解，且在不含單線態(tài)氧的堿性pH溶液中，Singlet Oxygen Sensor Green^®, SOSG會(huì)發(fā)熒光。不過，當(dāng)進(jìn)行適當(dāng)?shù)牟僮?，綠色熒光信號(hào)的強(qiáng)度與單線態(tài)氧（¹O₂）含量相關(guān)，且不會(huì)受其他ROS的明顯干擾。

【MK應(yīng)用】Singlet Oxygen Sensor Green^®, SOSG證實(shí)能用來檢測(cè)溶液和植物組織中的單線態(tài)氧（¹O₂）。

【MK使用方法】單線態(tài)氧活性氧探針SOSG

1. SOSG儲(chǔ)存液制備：收到貨按照≤-20℃避光干燥保存。用甲醇來制備儲(chǔ)存液，每100µg粉末加入33µl甲醇制備~5mM儲(chǔ)存液。正式實(shí)驗(yàn)前制備工作液，不能用完的工作液需丟棄，不可保存后再用。
2. 溶液檢測(cè)：SOSG不具細(xì)胞膜滲透性，設(shè)計(jì)用來檢測(cè)溶液環(huán)境內(nèi)的單線態(tài)氧。加的稀釋緩沖液和工作濃度需根據(jù)經(jīng)驗(yàn)來調(diào)整。建議起始工作濃度為1-10µM。

【爭(zhēng)議點(diǎn)】單線態(tài)氧活性氧探針SOSG

Singlet Oxygen Sensor Green^®, SOSG不具有細(xì)胞膜滲透性，能用于細(xì)胞單線態(tài)氧（¹O₂）檢測(cè)？【懋康整理】專麗持有方thermo（molecular probe）官芳說明此探針不具有細(xì)胞膜滲透性，適用于溶液體系單線態(tài)氧（¹O₂）檢測(cè)。然而，Gollmer A et al.報(bào)道SOSG能插入活哺乳動(dòng)物細(xì)胞（文獻(xiàn)來源：Gollmer A et al. Singlet Oxygen Sensor Green®: photochemical behavior in solution and in a mammalian cell. Photochem Photobiol. 2011 May-Jun;87(3):671-9.）。

訂購(gòu)信息：Thermo fisher原裝正品，大包裝拆開單賣，100μg /支，單支*700元。懋康生物長(zhǎng)期現(xiàn)貨供應(yīng)。

【溫馨提示】：見我司懋康生物整理的活性氧檢測(cè)探針專題（Probes for reactive oxygen species）。

相關(guān)產(chǎn)品：ROS研究常用的配套產(chǎn)品。

注意事項(xiàng)

為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

 — —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】

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