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產(chǎn)品中心
FerroOrange 亞鐵離子熒光探針

FerroOrange 亞鐵離子熒光探針

簡要描述:

FerroOrange 亞鐵離子熒光探針FerroOrange是一種特異性檢測不穩(wěn)定的鐵(II)離子(Fe2+)的熒光探針,定位在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(ER)。一旦與Fe2+反應(yīng)后,不可逆的生成一種橙色熒光產(chǎn)物(Absmax=542nm,F(xiàn)Lmax=572nm,圖1. FerroOrange的光譜特征)。

產(chǎn)品時(shí)間:2024-05-16

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FerroOrange (Fe2+indicator) 亞鐵離子熒光探針


產(chǎn)品標(biāo)簽

FeRhoNox-1;FerroOrange;Labile ferrous ion不穩(wěn)定鐵(II)離子;Fe2+熒光探針;Ferroptosis鐵死亡;C11 BODIPY 581/591脂質(zhì)過氧化探針;


產(chǎn)品信息

產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品編號(hào)               

規(guī)格                  

價(jià)格(元)         

FerroOrange (Fe2+indicator) 亞鐵離子熒光探針   

MX4559-24UG

24μg

2480

FerroOrange (Fe2+indicator) 亞鐵離子熒光探針

MX4559-48UG

2×24μg

4580


產(chǎn)品描述

FerroOrange是一種特異性檢測不穩(wěn)定的鐵(II)離子(Fe2+)的熒光探針,定位在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(ER)。一旦與Fe2+反應(yīng)后,不可逆的生成一種橙色熒光產(chǎn)物(Absmax=542nm,F(xiàn)Lmax=572nm,圖1. FerroOrange的光譜特征)。鐵(III)離子(Fe3+)或其它除鐵離子以外的二價(jià)金屬離子都不會(huì)使其熒光增強(qiáng)(見圖2. FerroOrange的反應(yīng)特異性)。FerroOrange也不會(huì)與鐵蛋白和其它物質(zhì)中的螯合鐵反應(yīng)。FerroOrange具強(qiáng)細(xì)胞膜滲透性和低細(xì)胞毒性(見附圖3. FerroOrange的細(xì)胞毒性測定),非常適用于活細(xì)胞成像。

FerroOrange 亞鐵離子熒光探針

圖1. FerroOrange的光譜特征。FerroOrange在0.05M HEPES buffer, pH 7.4內(nèi)的吸收光譜(左)和熒光光譜。吸收波長在542nm,熒光光譜在572nm。一旦與Fe2+反應(yīng),熒光強(qiáng)度顯著增加。

FerroOrange 亞鐵離子熒光探針

圖2. FerroOrange的反應(yīng)特異性。FerroOrange與各種金屬離子(左),活性氧或還原劑(右)的反應(yīng)性。僅當(dāng)與Fe2+反應(yīng),F(xiàn)erroOrange呈強(qiáng)熒光。


保存與運(yùn)輸方法

保存:-20℃避光干燥保存,至少1年有效。

運(yùn)輸:冰袋運(yùn)輸。


注意事項(xiàng)

  1. FerroOrange主要定位在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(見附圖4),但也可能檢測細(xì)胞質(zhì)池內(nèi)的Fe2+,目前針對這一點(diǎn)未做明確評(píng)估。

  2. 熒光染料均存在淬滅問題,請盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。

  3. 為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。


使用說明

1. 需要自行準(zhǔn)備的材料

1.1 細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)DMSO(比如:MS4601A-100ML)

1.2 合適的清洗和觀察緩沖液(比如:PBS, pH 7.4;HBSS;無血清培養(yǎng)基等)。不要含酚紅。


2. 探針準(zhǔn)備

2.1 從冰箱取出FerroOrange,置于室溫至少30min,將其置于微量離心機(jī)內(nèi)低速離心。將瓶內(nèi)的粉末離心到管底后,再開蓋。

2.2 往一管FerroOrange(24μg)內(nèi)加入35μl高質(zhì)量DMSO,用槍反復(fù)吹吸5次或以上,使其wan全溶解即得到1mMFerroOrange儲(chǔ)存液。若單次不能用完儲(chǔ)存液,請根據(jù)單次用量分裝,置于-20℃避光保存,一個(gè)月內(nèi)使用。

2.3 于正式實(shí)驗(yàn)前,用中性緩沖液或細(xì)胞培養(yǎng)基來稀釋1mM FerroOrange儲(chǔ)存液到所需工作濃度(比如:1μM),工作液需現(xiàn)配現(xiàn)用,盡快用完?!咀⒁猓核嵝匀芤簳?huì)氧化FerroOrange,嚴(yán)重影響探針的效率】。


3. 染色步驟

3.1于熒光培養(yǎng)皿中接種細(xì)胞,于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中孵育過夜。

3.2 染色步驟


4. 熒光檢測

對于熒光顯微鏡:通用的G激發(fā)濾片比如Cy3檢測用的濾片。

對于激光顯微鏡和流式細(xì)胞儀:532nm,514nm或561nm激光器用于激發(fā)。實(shí)在沒有,亦可用488nm激光器。發(fā)射波長為572nm。


相關(guān)產(chǎn)品

貨號(hào)

名稱

規(guī)格                

MX5211-1MG      

C11 BODIPY 581/591 脂質(zhì)過氧化熒光探針

1mg

MX4558-50UG

FeRhoNox-1 (Fe2+indicator) 亞鐵離子熒光探針

50μg

MX4559-24UG

FerroOrange (Fe2+indicator) 亞鐵離子熒光探針

24μg

MX5401-1MG

MitoPerOx Mitochondrial Lipid Peroxidation Indicator 線粒體脂質(zhì)過氧化探針 

1mg

MX5402-1MG

BODIPY 558/568 C12脂質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)熒光探針

1mg


附錄 FerroOrange的細(xì)胞毒性

FerroOrange 亞鐵離子熒光探針

圖3.各種濃度FerroOrange對HepG2細(xì)胞的代謝活性。不同濃度的FerroOrange(以1% DMSO作為共溶劑)加入細(xì)胞內(nèi),培養(yǎng)24h后,用MTT法測定代謝活性。(n=3)

 

附錄FerroOrange的胞內(nèi)定位

FerroOrange 亞鐵離子熒光探針

圖4.FerroOrange的胞內(nèi)定位。將FerroOrange(紅色), ER Tracker(綠色)和Hoechist 3342(藍(lán)色)加載進(jìn)入HT-1080細(xì)胞并成像觀察。FerroOrange主要定位在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。Bar:10 μm。

 

 — —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】

 

 

上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域研究的試劑、儀器和實(shí)驗(yàn)室消耗品與實(shí)驗(yàn)服務(wù)工作,主要從事細(xì)胞生物學(xué)、植物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白組學(xué)。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等領(lǐng)域。 本公司秉承“以人為本,以誠為信、合同守信"的經(jīng)營理念。堅(jiān)持"品質(zhì)保障"的原則為廣大客戶提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。




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