鈣黃綠素深紅乙酰氧基甲酯 熒光探針
簡要描述:
鈣黃綠素深紅乙酰氧基甲酯 熒光探針Calcein, AM,中文名鈣黃綠素乙酰甲酯,CAS NO:148504-34-1,一種具細胞膜滲透性zui受huan迎的活細胞熒光染料,用來標記和監(jiān)測活細胞功能,呈綠色熒光(Ex/Em= 490nm/515nm)。
產(chǎn)品時間:2024-07-16
Calcein Deep Red AM 鈣黃綠素深紅乙酰氧基甲酯
產(chǎn)品關(guān)鍵詞:
Calcein, AM 鈣黃綠素AM;Calcein Deep Red 鈣黃綠素深紅色;Cy5; 活細胞染色;Fluorescein diacetate (FDA);Propidium Iodide(PI)碘化丙啶;
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 價格(元) |
Calcein Deep Red AM 鈣黃綠素深紅乙酰氧基甲酯 | MX3016-1MG | 1mg | 3380 |
【溫馨提示】:見我司(懋康生物)整理的鈣黃綠素(Calcein)系列產(chǎn)品專題,尋找最合適波長的鈣黃綠素活細胞探針。
產(chǎn)品描述
Calcein, AM,中文名鈣黃綠素乙酰甲酯,CAS NO:148504-34-1,一種具細胞膜滲透性zui受huan迎的活細胞熒光染料,用來標記和監(jiān)測活細胞功能,呈綠色熒光(Ex/Em= 490nm/515nm)。然而,Calcein, AM單一顏色使其不能將其用在多重標記實驗,比如,其無法和GFP轉(zhuǎn)染細胞聯(lián)合使用,因光譜一致。為了解決這一應(yīng)用缺陷,我司特別開發(fā)出Calcein Red(貨號:MX3013),Calcein Deep Red(貨號:MX3016)這些衍生物,能夠聯(lián)合GFP或FITC等熒光素實現(xiàn)對活細胞的多重標記和功能分析。
我司(懋康生物)提供的鈣黃綠素深紅乙酰氧基甲酯(Calcein Deep Red AM)自身無熒光,具有細胞膜滲透性。能夠輕易進入活細胞,被細胞內(nèi)酯酶水解生成鈣黃綠素深紅(Calcein Deep Red),產(chǎn)生強烈的深紅色熒光(Ex/Em=643/663nm),用標準的Cy5濾片設(shè)置檢測。
產(chǎn)品特性
1) 同義名:Calcein Deep Red AM;Calcein Deep Red AM Ester;鈣黃綠素乙酰氧基甲酯(深紅色),鈣黃綠素深紅乙酰氧基甲酯;
2) 分子量:~600
3) 純度:≥95%(HPLC)
4) Ex/Em:643/663nm
5) 溶解性:溶于DMSO(1~5mM)
應(yīng)用實例
Fig 1.HeLa細胞(活細胞+固定細胞)經(jīng)Calcein Deep Red AM(# MX3016)染色的圖片。
保存與運輸方法
保存:-20℃干燥保存,避免強光直射,有效期一年。
運輸:冰袋運輸。
注意事項
熒光染料均存在淬滅問題,請盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。
本品從冰箱取出后請在干燥的環(huán)境放至室溫后再開封。由于試劑微量,開封前請將其短暫離心,以保證粉末落入管底。
本品對濕度非常敏感,粉末保存一定要保持干燥。儲存液需要分裝避光凍存,且必須緊緊密封蓋子,干燥保存。工作液必須現(xiàn)配現(xiàn)用。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用方法
1、儲存液制備
儲存液配制范圍可為2~5 mM,具體根據(jù)工作濃度來決定,建議提前配制成1000×儲存液。若使用的工作液為5μM,那么可配制5mM的儲存液,即往1mgCalcein Deep RedAM(Mw ~600)內(nèi)加入333μl細胞培養(yǎng)級別的DMSO(貨號:MS4601A-100ML)即可。儲存液需要根據(jù)單次用量分裝,-20℃避光干燥保存,一定要避免受潮,此種情況下可穩(wěn)定保存數(shù)月。
2、染色工作液制備
于正式實驗前,或溶解Calcein Deep RedAM粉末配制儲存液,或取一管已配制好的Calcein Deep RedAM儲存液并回至室溫使充分融化。用添加有2.5mM丙huang舒的HHBS(Hanks with 20mM Hepes buffer)或其他適當?shù)木彌_液(pH 7.0)稀釋儲存液到5~10 µM工作濃度。
【注1:Calcein Deep Red染色工作液很不穩(wěn)定,需要使用前配制?!?/span>
【注2:許多細胞都含有機陰離子轉(zhuǎn)運體。因此高度推薦染色工作液內(nèi)添加2.5mM丙huang舒(有機陰離子轉(zhuǎn)運體抑制劑),以防止熒光探針泄露到細胞外?!?/span>
3、染色步驟
以下是基于96孔板的Calcein Deep Red活細胞染色步驟,僅作參考。具體實驗請根據(jù)自身要求做調(diào)整。
細胞準備:于黑框/透明底的96孔微孔板內(nèi)按照100~10,000個細胞/孔的量鋪板。設(shè)置空白孔(不含細胞的培養(yǎng)基)?!咀⒁狻浚好糠N細胞系需要根據(jù)實際情況來確認細胞增殖或細胞毒性誘導(dǎo)的細胞密度。增殖分析,細胞密度相對少些;毒性分析,起始細胞密度高些。建議96孔板的單孔體積為100 µL。
藥物處理:加待測藥物到細胞內(nèi)處理適當時間(比如24h,48h或96h)。設(shè)置空白孔(不含細胞的培養(yǎng)基),加入相應(yīng)量的待測藥物?!咀⒁狻浚核幬锾砑忧翱刹挥们逑醇毎?。然而,若是藥物是血清敏感性,那在添加藥物前需要吸掉生長培養(yǎng)基和血清因子。替換之細胞用無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)。
吸掉培養(yǎng)基?!咀⒁猓禾结樇虞d前必須去除培養(yǎng)基】
按照100 µL/孔(96孔板)的量加入Calcein Deep Red染色工作液。
室溫或37℃避光孵育1h?!咀⒁?:適當?shù)姆跤龝r間取決于細胞類型和使用的細胞濃度。每個實驗建議進行孵育時間優(yōu)化?!俊咀⒁?:對于懸浮細胞,探針孵育結(jié)束后,于800rpm離心2min?!?/span>
用含合適濾光片(Ex/Em= 643nm/663nm)的儀器進行熒光檢測。【注意:如果熒光背景高,可在熒光信號檢測前用含2.5mM丙huang舒的HHBS緩沖液替換Calcein Deep Red染色工作液?!?/span>
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貨號 | 名稱 | 規(guī)格 |
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MZ8472-154MG | Probenecid Sodium, Water Soluble丙huang舒鈉(水溶性) | 2×77mg |
MX4205-10MG | Propidium Iodide碘化丙啶 | 10mg |
— —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】
上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域研究的試劑、儀器和實驗室消耗品與實驗服務(wù)工作,主要從事細胞生物學(xué)、植物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白組學(xué)。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等領(lǐng)域。 本公司秉承“以人為本,以誠為信、合同守信"的經(jīng)營理念。堅持"品質(zhì)保障"的原則為廣大客戶提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。
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