一氧化氮檢測試劑盒(顯色法)細胞染色
簡要描述:
一氧化氮檢測試劑盒(顯色法)細胞染色是一種活性基,在許多關(guān)鍵生理功能中發(fā)揮重要作用。一氧化氮,一氧化氮合酶(NOS)催化精氨suan的氧化產(chǎn)物,參與宿主防御和發(fā)育、調(diào)節(jié)蛋白活化、以及與功能生物分子之間的直接共價相互作用。
產(chǎn)品時間:2024-03-12
Nitric Oxide Colorimetric Assay Kit
一氧化氮檢測試劑盒(顯色法)
產(chǎn)品標簽
Nitric Oxide (NO) 一氧化氮;NO含量檢測;分光光度計檢測;Griess reagent;Carboxy-PTIO 一氧化氮清除劑;DAF-FM DA;
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 價格(元) |
Nitric Oxide Colorimetric Assay Kit 一氧化氮檢測試劑盒(顯色法) | MX4731-500T | 500T | 729 |
產(chǎn)品描述
一氧化氮(Nitric Oxide, NO)是一種活性基,在許多關(guān)鍵生理功能中發(fā)揮重要作用。一氧化氮,一氧化氮合酶(NOS)催化jing氨suan的氧化產(chǎn)物,參與宿主防御和發(fā)育、調(diào)節(jié)蛋白活化、以及與功能生物分子之間的直接共價相互作用。一氧化氮生成后迅速代謝生成亞硝酸鹽(Nitrite)和硝酸鹽(Nitrate),兩種首要的、穩(wěn)定的和非揮發(fā)性的裂解產(chǎn)物,通過對這兩種產(chǎn)物的測定能間接反映樣本內(nèi)的一氧化氮水平。
本一氧化氮檢測試劑盒(Nitric Oxide Colorimetric Assay Kit)利用經(jīng)典的Griess reagent,對亞硝酸鹽進行定量測定。本試劑盒以亞硝suan鈉為標準品,通過優(yōu)化的檢測體系,檢測下限達1μM,且在1~100μM范圍內(nèi)具有好的的線性關(guān)系。本試劑盒不僅能檢測細胞、組織或培養(yǎng)液中的一氧化氮含量,還能檢測血清、血漿或尿液中的一氧化氮含量。
產(chǎn)品組成
組分編號 | 組分名稱 | 規(guī)格 | 保存方式 |
MX4731-A | 1M NaNO2 | 1ml | 2-8℃避光保存 |
MX4731-B | Griess Reagent I | 25mL | 2-8℃避光保存 |
MX4731-C | Griess Reagent II | 25mL | 2-8℃避光保存 |
保存與運輸方法
保存:2-8℃避光保存,至少4個月穩(wěn)定。
運輸:冰袋運輸。
保存與運輸方法
保存:-20℃干燥保存,至少1年有效。
運輸:冰袋運輸。
注意事項
本試劑盒內(nèi)的組分若保存不當發(fā)生顏色變化或沉淀,說明溶液已經(jīng)失效,請勿再用。
當檢測細胞或組織一氧化氮含量,不建議使用RIPA裂解液,因其可能在后續(xù)實驗中產(chǎn)生沉淀,影響測試。建議使用免疫印跡及免疫沉淀用裂解液(不含蛋白酶/磷酸酶抑制劑)(貨號:MP1508-100ML)。
本試劑盒僅測定的是亞硝酸鹽含量,不能檢測硝酸鹽,反映的并非總一氧化氮含量,只能在很大程度上反映一氧化氮的相對量,適合不需要精確定量的實驗。若需要測定總一氧化氮含量,請選擇總一氧化氮檢測試劑盒(顯色法)(貨號:MX4732-50T),此試劑盒利用硝酸鹽還原酶將硝酸鹽還原為亞硝酸鹽,然后利用Griess reagent測定亞硝酸鹽,進而反映總一氧化氮水平。
本試劑盒對人體有害,請注意適當防護,避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
操作步驟
【注意】本試劑盒可用于培養(yǎng)液中的一氧化氮測定,培養(yǎng)液內(nèi)的酚紅和10%血清對測定無明顯干擾。
【注意】本試劑盒可用于血清中的一氧化氮測定。當只需粗略計算,可直接用水稀釋標準品,從而計算出血樣中一氧化氮含量。當需精確計算,如果待測的正常血清是常見血清,能從文獻查閱到一氧化氮濃度,那么用此已經(jīng)一氧化氮濃度的正常血清稀釋標準品,這樣能得到比較精確的一氧化氮濃度?;蚴褂靡阎獫舛鹊娜嘶蚱渌麆游镅鍋硐♂寴藴势芬部蛇_到目的?;騾⒖嘉墨I進行血清中一氧化氮濃度的測定。
【注意】樣品中存在的一些內(nèi)在成分可能會干擾測定,導致OD值和靈敏度降低。干擾程度依次順序:尿液>血清>血漿>培養(yǎng)基。
需要設備
96孔酶標儀或可見光分光光度計,加波長540nm,或在520~560nm下測定,靈敏度可能會降低。
準備步驟
2.1 實驗前將試劑從冰箱取出回溫至室溫。
2.2 標準品準備:每次測量均新做標準曲線,用待測樣品所用溶液來稀釋標準品,使得濃度在1~100μM內(nèi)。
比如:當樣品為細胞培養(yǎng)液上清,細胞培養(yǎng)液為DMEM+10% FBS,則用DMEM+10% FBS稀釋標準品。標準品的濃度通??扇?,1,2,5,10,20,40,60,80,100μM。
2.3 樣品準備:a)當樣品為培養(yǎng)液上清,可直接取樣。如果存在沉淀物,則需離心后取上清;b)當樣品為組織或細胞,可快速凍融裂解,然后離心沉淀取上清,體積不足50μl,可用雙蒸水、超純水或0.9% NaCl稀釋(相應的標準品也需用雙蒸水、超純水或0.9% NaCl稀釋)。細胞或組織也可用免疫印跡及免疫沉淀用裂解液(不含蛋白酶/磷酸酶抑制劑)來裂解,同樣的,標準品需用裂解液稀釋。
三、測定步驟
3.1 取50μl標準品或樣品,加入96孔板內(nèi),做好標記;
3.2 每孔加入提前回至室溫的50μl Griess reagent I;
3.3 每孔加入提前回至室溫的50μl Griess reagent II;
3.4 室溫避光孵育5min;
3.5 在540nm(或520~560nm)測定吸光度。需在30min內(nèi)測完,以防褪色降低靈敏度。
3.6 以標準品濃度為橫坐標,吸光度OD值為縱坐標繪制標準曲線,獲得橫縱坐標之間的函數(shù)關(guān)系式。之后將樣品OD值代入公式來計算一氧化氮濃度。
相關(guān)產(chǎn)品
貨號 | 名稱 | 規(guī)格 |
MP1508-100ML | 免疫印跡及免疫沉淀用裂解液(不含蛋白酶/磷酸酶抑制劑) | 100ml |
MX4731-500T | Nitric Oxide Colorimetric Assay Kit 一氧化氮檢測試劑盒(顯色法) | 500T |
MX4732-50T | Total Nitric Oxide Colorimetric Assay Kit 總一氧化氮檢測試劑盒(顯色法) | 50T |
MX4701-10MG | Carboxy-PTIO 一氧化氮(NO)清除劑 | 10mg |
MX4702-100T | DAF-FM DA (5mM in DMSO) 一氧化氮(NO)熒光探針 | 100T |
MX4712-25G | Sodium Nitroprusside (SNP) Dihydrate 硝pu鈉二水合物 | 25g |
MX4713-10MG | S-Nitrosoglutathione (GSNO) 亞硝基谷胱gan肽 | 10mg |
MX4714-100MG | 2,3-Diaminonaphthalene (DAN), Suitable for fluorescence 2,3-二氨基萘 | 100mg |
MX4715-100MG | 1,2-Diaminoanthraquinone (DAA, DAQ) 1,2-二氨基蒽醌 | 100mg |
— —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】
上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學和生物技術(shù)領(lǐng)域研究的試劑、儀器和實驗室消耗品與實驗服務工作,主要從事細胞生物學、植物學、分子生物學、免疫學、生物化學、蛋白組學。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等領(lǐng)域。 本公司秉承“以人為本,以誠為信、合同守信"的經(jīng)營理念。堅持"品質(zhì)保障"的原則為廣大客戶提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。
一氧化氮檢測試劑盒(顯色法)細胞染色
一氧化氮檢測試劑盒(顯色法)細胞染色